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來(lái)源: 中南大學(xué)在職研究生 編輯:佚名
近期,藥學(xué)院劉玨文教授研究發(fā)現(xiàn)了依賴兩種金屬離子的具有RNA切割活性的DNA酶-- Ce13d,通過基于DMS (硫酸二甲酯)的DNA分子足跡結(jié)合Tb3+熒光探針等技術(shù)揭示了兩個(gè)金屬輔酶(Na+與Ce3+離子)與Ce13d的作用位點(diǎn)及作用機(jī)理。他發(fā)現(xiàn),Ce13d 酶活性中心的大環(huán)(loop)能夠形成Na+口袋,進(jìn)而特異性地與Na+結(jié)合;而Ce3+作用于底物的潛在切割位點(diǎn),降低反應(yīng)的活化能,實(shí)現(xiàn)Ce13d對(duì)底物的催化切割 (圖A)。這一研究首次明確了金屬離子在Ce13d酶中的具體作用,為DNA酶立體結(jié)構(gòu)研究提供了重要參考依據(jù)。該研究成果于2015年11月18日在牛津大學(xué)出版社(Oxford University Press)旗下學(xué)術(shù)刊物Nucleic Acids Research(IF=9.112)在線發(fā)表。
課題組同期還發(fā)現(xiàn)了一種活性同時(shí)依賴于金屬離子和有機(jī)溶劑的DNA酶 (EtNa),這種鈉離子依賴性的DNA酶,在水-醇共溶劑中,活性可增強(qiáng)1000倍以上。課題組據(jù)此開發(fā)了一種基于DNA酶的生物傳感器,并成功應(yīng)用于商業(yè)用酒中酒精濃度的檢測(cè)(圖B)。該研究成果于2015年11月9日在Wiley 出版集團(tuán)旗下學(xué)術(shù)期刊 ChemBioChem(IF=3.088)在線發(fā)表。